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摘要基因組原位雜交技術(shù)（GISH）對(duì)小麥-偃麥草遠(yuǎn)緣雜交后代進(jìn)行染色體組成分析，篩選抗黃矮病新種質(zhì)。通過(guò)優(yōu)化探針標(biāo)記、染色體預(yù)處理及雜交條件，成功鑒定出攜帶偃麥草抗性染色體的穩(wěn)定株系。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，目標(biāo)株系對(duì)黃矮病抗性顯著提升，為小麥抗病育種提供了重要材料。引言小麥黃矮病（BarleyYellowDwarfVirus,BYDV）是威脅全球小麥生產(chǎn)的重要病毒病害，可導(dǎo)致嚴(yán)重減產(chǎn)。傳統(tǒng)抗性種質(zhì)資源有限，遠(yuǎn)緣雜交是拓寬抗性基因來(lái)源的有效途徑。偃麥草（Thinopyrumspp.）因...

摘要通過(guò)基因轉(zhuǎn)染技術(shù)將肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF）導(dǎo)入關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞，探討其對(duì)細(xì)胞增殖、基質(zhì)合成及分化潛能的影響。實(shí)驗(yàn)采用威尼德電穿孔儀實(shí)現(xiàn)質(zhì)粒高效轉(zhuǎn)染，結(jié)合免疫熒光、qRT-PCR及Westernblot分析HGF表達(dá)及功能。結(jié)果顯示，HGF顯著促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖并增強(qiáng)膠原與蛋白聚糖合成，同時(shí)抑制細(xì)胞肥大化。研究表明，HGF基因干預(yù)可優(yōu)化軟骨細(xì)胞生物學(xué)特性，為關(guān)節(jié)退行性病變的再生治療提供新策略。引言關(guān)節(jié)軟骨損傷及退行性病變是骨科領(lǐng)域的治療難點(diǎn)，由于軟骨組織自我修復(fù)能力有限，傳統(tǒng)療法...

摘要研究通過(guò)電穿孔法將攜帶周期型馬來(lái)絲蟲(chóng)基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞，利用某試劑抗生素篩選獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染單克隆株。經(jīng)威尼德分子雜交儀檢測(cè)基因整合，qPCR及Westernblot驗(yàn)證表達(dá)水平，結(jié)合威尼德紫外交聯(lián)儀分析蛋白修飾。結(jié)果顯示，目標(biāo)基因在細(xì)胞中呈現(xiàn)穩(wěn)定周期性表達(dá)，晝夜節(jié)律振幅達(dá)3.8倍，為絲蟲(chóng)生物鐘機(jī)制研究提供了可重復(fù)的體外模型。引言馬來(lái)絲蟲(chóng)（Brugiamalayi）作為淋巴絲蟲(chóng)病的主要病原體，其生命周期受宿主生物鐘調(diào)控的現(xiàn)象已引起廣泛關(guān)注。近年研究發(fā)現(xiàn)，絲蟲(chóng)體內(nèi)存...

摘要TRAIL基因轉(zhuǎn)染至神經(jīng)干細(xì)胞，評(píng)估其對(duì)腫瘤細(xì)胞的靶向殺傷效應(yīng)。利用威尼德電穿孔儀完成基因轉(zhuǎn)染，采用某試劑進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)及功能驗(yàn)證。體外實(shí)驗(yàn)顯示，轉(zhuǎn)染后神經(jīng)干細(xì)胞高表達(dá)TRAIL蛋白，顯著誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)其可抑制裸鼠移植瘤生長(zhǎng)。結(jié)果表明，神經(jīng)干細(xì)胞攜帶TRAIL基因具備潛在抗腫瘤應(yīng)用價(jià)值。引言腫瘤的靶向治療是當(dāng)前研究熱點(diǎn)，傳統(tǒng)化療及放療因缺乏特異性易損傷正常組織。TRAIL（腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體）可選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，但其半衰期短、全身毒性限制臨...

摘要研究通過(guò)構(gòu)建bFGF基因表達(dá)載體，采用威尼德電穿孔儀對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染，探討其表達(dá)效率及生物學(xué)功能。實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了轉(zhuǎn)染條件，并通過(guò)Westernblot和免疫熒光技術(shù)檢測(cè)蛋白表達(dá)水平。結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中bFGF蛋白顯著上調(diào)，且細(xì)胞增殖活性增強(qiáng)。該研究為基于基因修飾的骨再生治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。引言堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）是調(diào)控細(xì)胞增殖、分化和組織修復(fù)的關(guān)鍵因子，其在骨代謝中的作用備受關(guān)注。骨髓基質(zhì)細(xì)胞（BMSCs）具有多向分化潛能，是骨組織工程的重要種子細(xì)...

摘要酪氨酸羥化酶（TH）基因的重組質(zhì)粒，利用威尼德電穿孔儀將其轉(zhuǎn)染至神經(jīng)干細(xì)胞（NSCs），探討TH基因在NSCs中的表達(dá)效率及對(duì)多巴胺能分化的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染后細(xì)胞TH蛋白表達(dá)顯著升高，且分化后多巴胺能神經(jīng)元標(biāo)志物陽(yáng)性率增加。結(jié)果表明，TH基因轉(zhuǎn)染可有效促進(jìn)NSCs向多巴胺能方向分化，為神經(jīng)退行性疾病的細(xì)胞治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。引言神經(jīng)干細(xì)胞（NSCs）因其自我更新和多向分化潛能，成為再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。酪氨酸羥化酶（TH）作為多巴胺合成的限速酶，其表達(dá)水平直接影響...

選擇適合植物原生質(zhì)體電穿孔實(shí)驗(yàn)的電穿孔儀，需要考慮以下幾個(gè)方面：1.電穿孔儀的類型：雙波全能型電穿孔儀：威尼德的雙波全能型電穿孔儀等，結(jié)合了指數(shù)波和方波的優(yōu)點(diǎn)，具有更廣泛的適用性和靈活性，可根據(jù)不同植物原生質(zhì)體的特性和實(shí)驗(yàn)需求，選擇合適的波型和參數(shù)，是進(jìn)行植物原生質(zhì)體電穿孔實(shí)驗(yàn)的理想選擇之一。2.參數(shù)設(shè)置范圍：電壓調(diào)節(jié)范圍：植物原生質(zhì)體電穿孔實(shí)驗(yàn)通常需要較高的電壓，一般在1003000V之間。脈沖持續(xù)時(shí)間：脈沖持續(xù)時(shí)間一般在1μs10ms之間。較短的脈沖適用于對(duì)電場(chǎng)敏感的植物...

摘要分子克隆技術(shù)構(gòu)建了RAB5A基因的真核表達(dá)載體，并驗(yàn)證其功能。利用威尼德電穿孔儀將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至HEK293T細(xì)胞，通過(guò)熒光顯微觀察和Westernblot檢測(cè)RAB5A蛋白表達(dá)。結(jié)果表明，載體成功定向克隆RAB5A基因，并在真核細(xì)胞中高效表達(dá)，為后續(xù)研究RAB5A的細(xì)胞功能奠定基礎(chǔ)。引言RAB5A是調(diào)控早期內(nèi)吞體運(yùn)輸?shù)年P(guān)鍵小GTP酶，其功能異常與腫瘤轉(zhuǎn)移、神經(jīng)退行性疾病密切相關(guān)。目前，針對(duì)RAB5A的研究多依賴瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)，但穩(wěn)定表達(dá)載體的缺乏限制了其功能分析的深度。定...